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2008.6.26 二氧化氯對靈芝菌絲生長的影響 (點閱 : 3204 次)
 
作者︰黨建章, 朱海蘭, 楊智偉, 黃仕容
【關鍵詞】 二氧化氯;,,靈芝;,,菌絲生長

  摘要︰目的探討二氧化氯作為消毒劑應用於靈芝栽培和液體培養。方法平板法測定靈芝菌絲的生長和搖瓶發酵法測定靈芝的生物量。結果在未高溫滅菌的培養基中添加 0.7%(v•v-1)的二氧化氯,靈芝菌絲生長良好;靈芝菌絲液體發酵重量接近對照組。結論為靈芝栽培和液體發酵培養奠定基礎。

  關鍵詞︰二氧化氯; 靈芝; 菌絲生長
  The Effects of Chlorine Dioxide on the Mycelium Growth of Ganoderma lucidum
  Abstract︰ObjectiveTo explore the application of chlorine dioxide as antiseptic in cultivation and submerged cultural of Ganoderma lucidum.MethodsThe mycelium growth of Ganoderma lucidum was determined by plate culture method and biomass by submerged culture method. ResultsMycelium of Ganoderma lucidum grew fine and the weight of it came close to the contrast when 0.7% (v•v-1)chlorine dioxide was added to the medium which was not sterilized by high temperature. ConclusionThis provides a firm foundation for the cultivation and submerged culture of Ganoderma lucidum.
  Key words︰Chlorine dioxide; Ganoderma lucidum; Mycelium growth

  靈芝Ganoderma lucidum作為藥用真菌其功效已家喻戶曉。近年來靈芝作為保健食品和美容化妝品的添加劑,其應用日益廣泛。道統方法栽培靈芝,培養料均要高溫滅菌。筆者在篩選靈芝培養的消毒劑時,發現二氧化氯對各類微生物都有較強的殺滅和抑制作用,而且對人畜無害〔1〕,但對靈芝菌生長卻作用甚微。本文初步研究了不同濃度二氧化氯對靈芝菌絲生長的影響,以及7種不同靈芝菌耐受二氧化氯的能力。
  1 材料與儀器
  1.1 供試菌種 赤芝(Ganoderma.lucidum)AS. 565,由本系提供。美國靈芝、日本靈芝、惠州靈芝、信州靈芝、紫芝、黑芝均購自山東金鄉真菌研究所。楊樹菇、雲芝、茯苓、茶新菇、金針菇均購自華中農業大學。霉菌(黑曲霉、根霉、青霉),細菌(大腸杆菌、枯草杆菌)由本系提供。
  1.2 斜面培養基(%)馬鈴薯(去皮)20;葡萄糖 2;KH2PO4 0.3;MgSO4•7H2O 0.15;瓊脂 2;pH6.5。
  1.3 搖瓶種子和發酵培養基(%)葡萄糖20 g;蛋白胨10 g;酵母膏2 g;水1 000 ml;pH自然。
  1.4 藥品二氧化氯(ClO2)為深圳市科瑞德消毒用品科技開發有限公司產品,商品製劑 ClO2含量為2%(W•v-1),用前加適量檸檬酸活化。其他化學試劑均為國產分析純。
  1.5 儀器恆溫培養箱 PYX-DHS-60X75-BS 上海躍進醫療器械廠,高溫消毒柜 TOMYSS-325 TOMY KOGYO CO.LTD.日本,MFS-11多功能三維旋混儀(搖瓶機) 深圳潘西諾生物科技有限公司。

  2 方法
  2.1 ClO2對霉菌和細菌的抑製作用每個培養皿中加入20 ml斜面培養基,趁熱加入 ClO2,搖勻,使 ClO2製劑最終濃度為0.1%∼1.0%(每100 ml培養基中加 ClO2製劑0.1 ∼1.0 ml),以未加 ClO2並經高壓滅菌過的培養基作為對照。涂布法接種霉菌和細菌,每個濃度每種菌各接3個培養皿,霉菌置於28℃、細菌置於37℃恆溫培養,隔天觀察生長情況,培養5 d。
  2.2 ClO2對赤芝的抑製作用 方法同上述,ClO2濃度為0.1%∼5.0%,每個濃度設3個重複。接入赤芝菌絲,置於28℃恆溫培養,隔天觀察菌絲生長情況,培養10 d。 3 結果
  3.1 ClO2對霉菌、細菌的抑製作用由表1可知,對照管5 d之內都長滿,而0.1%∼1.0%的 ClO2對上述微生物有明顯的抑製作用。其中真菌比原核微生物耐受 ClO2的能力強。
  表1 ClO2對霉菌、細菌的抑製作用(略)
  +++表示菌絲或菌落長滿平板;-表示無菌絲或菌落生長
  3.2 不同濃度 ClO2對赤芝的抑製作用由表2得知,ClO2濃度在0.6%∼0.7%時對赤芝有一定的抑製作用,使得赤芝萌發比對照晚2 d,但菌絲長滿平板的時間均為10 d。ClO2濃度在0.8%∼1.0%時,對靈芝的生長有明顯的抑製作用,濃度2.0%時完全抑製赤芝菌絲的生長。

  根據上述的結果,培養赤芝時,選用 ClO2的濃度為0.7%,此濃度對霉菌和細菌抑制作用強,但對赤芝的生長影響不大。
  3.3 0.7% ClO2對其他靈芝菌及食用菌的抑製作用表3中每種菌都設有對照組,其8∼10 d菌絲都能長滿。表3中0.7% ClO2能完全抑制紫芝的生長,原因還有待進一步研究。另外實驗所選用的幾種食用菌都有明顯的抑制作用。
  表2 不同濃度 ClO2對赤芝的抑製作用(略)
  +++表示菌絲或菌落長滿平板;-表示無菌絲或菌落生長
  表3 0.7% ClO2對靈芝菌及食用菌的抑製作用(略)
  3.4 ClO2對靈芝液體培養的影響由於多功能三維旋混儀每次只能放2個3 000 ml的三角瓶,因此搖瓶試驗需分批進行。結果見表4。
  表4 靈芝菌在搖瓶培養基培養的結果(略)

  由表4得知,對
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